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400-830-9659
产品分类
Western Blot-ECL特超敏发光液
ECL化学发光试剂盒

ECL化学发光试剂盒

  • 产品描述
产品简介

本产品ECL化学发光试剂盒是一种高灵敏度的化学发光试剂盒,基本原理是以luminol为基础的ECL化学发光。本产品能与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)发生化学反应,产生荧光,通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备(CCD相机等)检测样品。

本公司目前生产的ECL化学发光试剂盒有两种,分别是G2014 ECL化学发光试剂盒和G2020 超敏ECL化学发光试剂盒。对于丰度较高的目的蛋白检测,例如内参蛋白等,推荐使用G2014,可检测含量大于等于2 ng的目的蛋白。而对于低丰度较难检测的目的蛋白,推荐使用G2020,该产品灵敏度较G2014提高至少5倍,可检测到pg级含量的蛋白,且发光更稳定。

 


储存与运输

冰袋(wet ice)运输;4℃避光保存,有效期12个月。如果长期不用,可以-20℃保存更长时间。

 


组成

Component Number

Component

G2014-50ML

G2014-1

ECL A液

50 mL

G2014-2

ECL B液

50 mL

说明书

1份

 


操作步骤

1. 配制ECL工作液:将ECL A液和ECL B液等体积混合,注意4℃避光保存。现配现用,2天内使用。

2. Western实验中PVDF膜经二抗孵育后,多次洗涤,滤纸吸去多余液体。在曝光匣上贴两层PE手套或者其他透明薄膜,将PVDF膜的蛋白面朝上放在曝光匣两层薄膜之间,加入混合好的ECL工作溶液覆盖在膜上放置1-2 min。

3. 用滤纸或吸水纸吸去ECL工作液,盖上层薄膜开始压胶片。

4. 压完的胶片用显影、定影试剂(推荐G2019G2023G2024)进行显影和定影。根据发光强度调整曝光条件。

 


注意事项

1. ECL A液和B液在吸取过程中必须要更换吸头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,另外金属离子的污染会降低本试剂的灵敏度,请注意用干净吸头。使用后密封保存。

2. 如果曝光后背景很深,可能原因有二抗浓度过高,或一抗浓度过高,或者封闭液不合适,换用其他封闭液。

3. 如果荧光迅速淬灭,可能原因是目的条带荧光过强,导致HRP迅速消耗ECL。

4. 如果没有发光信号,可能是目的蛋白表达很弱,可延长压片时间。

5. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套

 

本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

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