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产品分类
支原体清除剂
0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚红)

0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚红)

  • 产品描述
产品名称 货号 包装规格  单位 目录价
0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚红) DIB4016-100ml 100 mL 130

产品简介

胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在37℃ pH 8.0条件下消化能力最强。常用胰酶工作浓度为0.25%。EDTA可以螯合钙镁离子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到增强消化的效果。酚红是一种pH指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色,近中性时呈粉红色。

本产品为0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s缓冲液,添加0.9 mM EDTA,含酚红指示剂,经0.22 μm过滤除菌。

 


储存与运输

干冰(dry ice)运输;-20℃保存,有效期12个月。避免反复冻融。

 


操作说明

贴壁细胞

1. 吸去细胞培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。

2. 加入适量本产品覆盖细胞,室温静置消化1-5 min。

3. 显微镜下观察,当细胞出现明显收缩,用移液枪轻轻吹打细胞较容易将细胞吹打下来时,吸除胰酶细胞消化液,加入含血清的细胞培养液,轻轻吹打下细胞,制成细胞悬液,即可直接传代培养。如果用移液枪轻轻吹打时很难使细胞从板底脱落,表明消化时间不够,可加入胰酶细胞消化液重新消化。切忌避免过度消化。

 


注意事项

1. 由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况。

2. 本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染。

3. 本产品不宜4℃长期保存,避免反复冻融,建议分装成小份后-20℃保存。

4. 对于胰酶中EDTA、酚红的选择,可以根据实验需要,对于一般的肿瘤细胞,选择含EDTA的胰酶消化液。对于较敏感、脆弱的细胞,例如原代细胞及很容易消化的细胞,选择不含EDTA的胰酶消化液,如果细胞特别敏感,需要选择胰蛋白酶浓度更低的消化液。如果是需要用于流式细胞仪检测细胞凋亡,则选用不含EDTA的胰酶消化液。

5. 由于Hank’s溶液中NaHCO3含量较低,不建议将本产品用于37℃的CO2培养箱中消化,如果放入CO2相,溶液会迅速变酸性。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

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